Universidad Pública de Navarra - Nafarroako Univertsitate Publikoa

Módulo/Materia

Herramientas biotecnológicas/Técnicas para la Biotecnología

Subir

Descripción/Contenidos

Técnicas instrumentales separativas, de espectroscopia, centrifugación, inmunológicas, isótopos radioactivos, fluorescencia y quimioluminiscencia, microscopía, amplificación y secuenciación de ácidos nucleicos y proteínas, y otras técnicas de última generación.

Subir

Competencias genéricas

No aplica.

Subir

Competencias específicas

Subir

Resultados aprendizaje

RA03. Tener las habilidades experimentales y analíticas para trabajar con autonomía en un laboratorio siendo capaz de plantear experimentos y de describir, analizar, evaluar e interpretar la información resultante para proponer soluciones alternativas y novedosas frente a problemas conocidos y/o emergentes TIPO: Conocimientos o contenidos.

RA04. Conocer los principios fundamentales de las ciencias experimentales para ser capaz de integrarlos en los contenidos propios del grado TIPO: Conocimientos o contenidos.

RA09 - Analizar, interpretar y evaluar información, normativa y reglamentación relativa a su ámbito de actuación TIPO: Habilidades o destrezas.

RA20. Dominar fundamentos moleculares, herramientas, métodos y técnicas instrumentales de purificación, cuantificación y caracterización de las biomoléculas para aislar, diseñar, construir, modificar, clonar, expresar y detectar proteínas y ácidos nucleicos. TIPO: Competencias.

Subir

Metodología

Subir

Evaluación

Nota1: LA asistencia a las sesiones prácticas será obligatoria.

Nota 2: Si en alguna de las actividades no se cumpliera el mínimo para ponderar, la nota de la asignatura será como máximo 4,9 sobre 10 (suspenso).

Subir

Temario

Tema 1. Introducción. Seguridad, buenas prácticas, libreta de laboratorio, uso de materiales y reactivos, análisis estadístico, herramientas informáticas. Técnicas de preparación de muestras. Criterios de validación de un test analítico cuantitativo y semi-cuantitataivo.

Tema 2. Técnicas separativas. Centrifugación: principios básicos, centrifugación a baja, alta velocidad y ultracentrifugación, aplicaciones, fraccionamiento subcelular. Cromatografía: principios básicos, tipos principales y aplicaciones.

Tema 3. Espectroscopía. Principios básicos. Métodos básicos: ultravioleta, visible y fluorescencia. Espectroscopía de resonancia magnética nuclear. Espectroscopía de absorción electrónica. Espectroscopía de infrarrojo y su aplicación a las moléculas biológicas. Espectroscopía de emisión de fluorescencia y aplicación al análisis de biomoléculas.

Tema 4. Espectroscopía de masas. Principios básicos, tipos de espectrómetros, componentes principales y aplicaciones.

Tema 5. Electroforesis. Principios básicos, métodos electroforéticos y aplicaciones.

Tema 6. Técnicas inmunológicas. Reacción antígeno-anticuerpo. Producción de anticuerpos. Inmunoprecipitación. Inmunoelectroforesis. Inmunofluorescencia. Fluorescent activated cell sorting (FACS). ELISA.

Tema 7. Microscopía. Introducción a la microscopía óptica y confocal: fundamentos físicos, microscópicos y preparación de muestras. Técnicas de análisis de imágenes. Introducción a la microscopía electrónica: fundamento y tipos. El microscopio electrónico de transmisión (MET). El microscopio electrónico de barrido (MEB).

Tema 8. Amplificación de ácidos nucleicos. Métodos de extracción y criterios de pureza de ácidos nucleicos. Amplificación: características y reacción básica de la PCR, la RT-PCR, la PCR cuantitativa: métodos y aplicaciones.

Tema 9. Hibridación de ácidos nucleicos. Fundamentos y parámetros que afectan a la hibridación. Sondas moleculares: características y tipos, marcaje de sondas y tipo de marcadores. Técnicas de hibridación: Southern blot, Northern blot, Dot blot, Microarrays. Aplicaciones de las técnicas de hibridación.

Tema 10. Secuenciación de ácidos nucleicos. Introducción a la secuenciación de ácidos nucleicos. Métodos clásicos (degradación química (Maxam and Gilbert) y método enzimático (Sanger)) y métodos modernos de secuenciación (tecnologías de secuenciación de segunda generación (Next-generation sequencing (NGS)) y de tercera generación). Estrategias y aplicaciones de la secuenciación de ácidos nucleicos.

Subir

Programa de prácticas experimentales

Práctica 1. Validación de un método de análisis cuantitativo.

Práctica 2. Determinación de compuestos de interés biotecnológicos mediante técnicas separativas.

Práctica 3. Determinación de compuestos de interés biotecnológico mediante métodos espectrofotométricos.

Práctica 4. Determinación fluorimétrica de productos naturales mediante espectroscopia de emisión molecular.

Práctica 5. Técnicas separativas: centrifugación diferencial y en gradiente de densidades.

Práctica 6. Electroforesis de ADN. Electroforesis de Proteínas SDS-PAGE.

Práctica 7. ELISA y otras técnicas inmunológicas.

Práctica 8. Extracción de ADN/ARN total a partir de tejido animal y determinación de la calidad de ácidos nucleicos.

Práctica 9. Cuantificación absoluta de carga viral mediante qPCR: método de curva patrón. Análisis de expresión génica mediante qPCR: método de comparativa CT.

Práctica 10.  Principios y funcionamiento de los secuenciadores de segunda y tercera generación.

Subir

Bibliografía

Acceda a la bibliografía que el profesorado de la asignatura ha solicitado a la Biblioteca.

Subir

Idiomas

Castellano

Subir

Lugar de impartición

Aulario y laboratorios e instalaciones de la ETSIAB (edificios Los Olivos, El Sario, Instituto de Mutilva/IDAB (CSIC). Campus Arrosadía.

Subir